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載玻片的使用方法

[2013/7/18]

  1、涂片法是將材料均勻地涂布在載玻片上的一種制片方法。

  涂片材料有單細(xì)胞生物、小型藻類、血液、細(xì)菌培養(yǎng)液、動(dòng)植物的疏松組織、精巢、花藥等。

  涂片時(shí)應(yīng)注意:

  (1)載玻片必須清潔。

  (2)載玻片要持平。

  (3)涂層須均勻。涂抹液滴在載玻片中間偏右,用解剖刀刃或牙簽等涂勻。

  (4)涂層要薄。用另一載玻片作推片,沿滴有涂抹液的載玻片面(二載玻片夾角應(yīng)為30°-45°)由右向左輕輕推動(dòng),涂成均勻一薄層。

  (5)固定。如需固定可用化學(xué)固定劑或干燥法(細(xì)菌)固定。

  (6)染色。細(xì)菌用亞甲基藍(lán),血液用瑞氏染液,有時(shí)可以可以使用碘酒。染色液要蓋住全部涂面。

  (7)沖洗。用吸水紙吸干或烤干。

  (8)封片。長期保存用加拿大的樹膠封片。

  2、壓片法是將生物材料置于載玻片和蓋片之間,施加一定壓力,將組織細(xì)胞壓散的一種制片方法。

  3、裝片法是將生物材料采取整體封固制成玻片標(biāo)本的方法,用此法可制成臨時(shí)或永久性裝片。

  裝片材料有:微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、線蟲;水螅,植物的葉表皮;昆蟲的翅、足、口器,人的口腔上皮細(xì)胞等。

  裝片法制作時(shí)應(yīng)注意:

  (1)手持載玻片時(shí),應(yīng)注意持平,或放在平臺(tái)上。滴水時(shí)水量要適當(dāng),以恰好被蓋玻片蓋滿為度。

  (2)應(yīng)將材料用解剖針或鑷子展開不使重疊,展平在同一平面上。

  (3)放蓋玻片時(shí),從一側(cè)慢慢蓋在水滴上,防止出現(xiàn)氣泡。

  (4)染色時(shí),將一滴染色液滴在蓋玻片的一側(cè),用吸水紙從另一側(cè)吸引,使蓋玻片下的標(biāo)本均勻著色。著色后,用同樣的方法,滴一滴清水,把染色液吸出后,在顯微鏡下觀察。

  4、切片 是用從生物體上切取的薄片制成的玻片標(biāo)本。

  因要求不同,可用刀片進(jìn)行徒手切片,也可將組織塊包埋于石蠟或火棉膠中或以低溫冰凍,用切片機(jī)切片。切成5~10微米薄片,供光學(xué)顯微鏡觀察。用環(huán)氧樹脂或甲基丙烯酸包埋組織塊切制的超薄切片,其厚度在20~50納米,專供在電子顯微鏡下觀察。一般教學(xué)用的如根尖、莖的切片通稱石蠟切片。

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