細胞培養(yǎng)常見問題分析

細胞常見問題分析

1、冷凍管應(yīng)如何解凍？

取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可以超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。

2、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？

不能。每一細胞株均有其特定使用自己適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同的之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活。

3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？

不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)品極大的影響。來自不同特種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

4、懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？

一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。

5、欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？

欲回收動物細胞，其離心速率一般為300xg（約1，000rpm），5-10分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡。

6、如果細胞發(fā)生微生污染時，應(yīng)如何處理？

加入相應(yīng)抗生素。直接滅菌后丟棄。

7、各種細胞培養(yǎng)用的dish，flash是否均相同？

不同廠牌的dish或flash，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，雖對大部分細胞沒有太大之影響，惟少數(shù)則可能因使用廠牌不同之dish或flask而有顯著之生長差異。